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O ano de 2006 ficou marcado pela revelação de uma tecnologia que certamente será muito útil na área da medicina: pesquisadores foram capazes de criar, em laboratório, células-tronco análogas às células-tronco embrionárias (CTE). As denominadas células-tronco pluripotentes induzidas ou IPSCs (do inglês, Induced Pluripotent Stem Cells), assim como as CTEs, são capazes de se diferenciar teoricamente em todos os tipos celulares que formam o corpo de um indivíduo. Estas células foram geradas através da indução da produção de moléculas características de CTEs em células isoladas da pele de indivíduos. Quando mantidas em meios de cultura específicos, as IPSCs apresentaram a capacidade de se diferenciarem, por exemplo, em células nervosas, células cardíacas e células hepáticas.





No futuro, com o desenvolvimento destas técnicas, será possível usar IPSCs em terapia celular, ou seja, na geração de células apropriadas para

Sagot :

ladyanneaguiar

Resposta:

muitos duvida

Explicação:

Resposta:

a) O primeiro passo é isolar os fibroblastos da derme de camundongos. Para isso, um fragmento de tecido é removido e com a utilização de enzimas proteolíticas (tripsina, por exemplo) e um sequestrador de cálcio (EDTA) as células são individualizadas. Como as células precisam ser mantidas vivas fora do organismo, procede-se a sua cultura em frascos com meio de cultura apropriado.

b) Os fibroblastos são facilmente separados do restante das células da derme, pois são células aderentes e sobrevivem por mais tempo em cultura. Assim, conforme a cultura for sofrendo passagens, a população de células se tornará mais homogênea. Pela indução da produção de moléculas típicas de CTEs, especificamente as proteínas produto dos genes NANOG, OCT-4, SOX-2 e CMYC, os fibroblastos são transformados em IPSCs.

Essas células, por sua vez, também precisam ser mantidas em cultura, submersas em meio apropriado e em frascos de cultura específicos para o cultivo de CTEs. Esses frascos apresentam uma camada de substâncias no seu fundo que auxilia, juntamente com o meio de cultura, a sobrevivência das IPSCs. Para diferenciá-las em cardiomiócitos, as IPSCs são acondicionadas, por certo tempo, em meios de cultura cuja constituição induz tal diferenciação. Após este período, é necessário verificar se houve diferenciação. Isto pode ser feito com a utilização de anticorpos marcados contra a proteína miosina (característica de células cardíacas). Se os anticorpos forem marcados com uma molécula fluorescente, será possível verificar a presença de miosina em microscópio de fluorescência.

c) Depois de verificada a ocorrência de diferenciação, é necessário separar os cardiomiócitos das IPSCs que não diferenciaram. Para isto, podem ser utilizados novamente os anticorpos marcados que reconhecem a miosina. Os anticorpos são adicionados à mistura de células e depois ela é passada por um equipamento do tipo cell sorter. Por esse procedimento, as células marcadas com anticorpos fluorescentes (os cardiomiócitos) serão separadas das IPSCs que não diferenciaram.

Explicação:

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